^{<option id="uks0m"></option>}

熱門(mén)搜索：ELISA試劑盒，PVC試劑盒，生化試劑盒，分子生物學(xué)試劑盒，常規生化試劑盒，ATCC細胞，USP標準品，中檢所標準品，科研抗體

產(chǎn)品分類(lèi)

Product category

新聞資訊 / news

您的位置：網(wǎng)站首頁(yè) > 新聞資訊 > 小鼠瘦素檢測試劑盒的操作流程是什么

小鼠瘦素檢測試劑盒的操作流程是什么

發(fā)布時(shí)間： 2022-07-07　　點(diǎn)擊次數： 473次

　　小鼠瘦素檢測試劑盒是用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。

　　小鼠瘦素檢測試劑盒的操作流程：

　　(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個(gè)平行孔；設兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個(gè)空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

　　(2)酶標板置4℃，包被過(guò)夜。

　　(3)洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去)，之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

　　(4)陰性對照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

　　(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

　　(6)洗板，同(4)。

　　(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。

　　(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

　　(9)洗板，同(4)。

　　(10)每孔加TMB顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

　　(11)每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應。