人糖缺失性轉鐵蛋白 CDT ELISA試劑盒

人糖缺失性轉鐵蛋白 CDT ELISA試劑盒

操作流程如下：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個(gè)平行孔；設兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液         100μl；另設一個(gè)空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl?！?nbsp;                                                                                     

（2）酶標板置4℃，包被過(guò)夜。                                                                                                                                    

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分 鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。                                                              

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。                     　

（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min?！?nbsp;                                                                                                   

（6）洗板，同（4）。                                                                                                                                              　

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?！?nbsp;                                                                          

（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。                                                                                                    　

（9）洗板，同（4）?！?nbsp;                                                                                                                                             

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min?！?nbsp;                                                          

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。                                                                                                               　

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃    痕或指印等造成的光干擾。                                                                                                                      

（13）產(chǎn)品僅用于科研數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標     準。