小鼠血栓素B2試劑盒

　　夾心法（SandwichELISA）分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法：

　　小鼠血栓素B2試劑盒中抗原的2個(gè)不同的抗原表位被兩個(gè)抗體——捕捉抗體和檢測抗體，分別結合。捕捉抗體固定于載體即酶標板上，檢測抗體通過(guò)結合抗原進(jìn)行顯色分析。應用于雙抗體夾心法檢測的捕捉抗體通常是單抗，偶爾有用多抗做為捕捉抗體的情況，但很少見(jiàn)，因為以多抗作為捕捉抗體容易出現交叉反應而降低特異性。檢測抗體通常為多抗，在商業(yè)化的科研試劑盒中經(jīng)常用到標記的山羊多抗，再讓標記的多抗與HRP標記的親和素或者鏈霉親和素結合，然后再加HRP也就是辣根過(guò)氧化物酶的底物，通常是TMB反應顯色，這種方法是在傳統的HRP酶標記抗體的雙抗體夾心法ELISA中引入了-親和素放大系統。不過(guò)也有用單抗做檢測抗體的情況，尤其是在科研中。雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專(zhuān)一性的優(yōu)勢，但該法只適用于有多個(gè)結合位點(diǎn)的抗原檢測，主要用于檢測各種大分子抗原——例如在醫學(xué)檢測中測定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關(guān)的，以及在科研中檢測細胞因子等。由于雙抗體夾心法特異性高，在檢測過(guò)程中有時(shí)會(huì )將樣本和酶標抗體同時(shí)加入進(jìn)行反應，稱(chēng)為雙抗體夾心一步法，因為操作時(shí)間短，在商業(yè)化生產(chǎn)中有很大優(yōu)勢。但雙抗體夾心一步法要特別注意ELISA中的鉤狀效應（hookffect），因為此時(shí)如果樣本中抗原含量過(guò)高會(huì )導致其與固相抗體和酶標抗體均有結合而無(wú)法形成“夾心復合物"，此時(shí)測出的結果將低于實(shí)際含量甚至是陰性結果。因此，如果使用雙抗體夾心一步法測定樣本中抗原含量時(shí)要注意測量的線(xiàn)性范圍，另外使用高親和力的單抗也可削弱鉤狀效應。